Guía provisional sobre recolección de muestras, procesamiento y pruebas en pacientes presuntamente infectados con el virus de la nueva influenza A (H1N1)

13 de mayo de 2009, 12:45 a.m., hora del este

Objetivo: proporcionar una guía provisional sobre la recolección adecuada de muestras, almacenamiento, procesamiento y pruebas en pacientes presuntamente infectados con el virus de la nueva influenza A (H1N1).

Definición de casos

Un caso confirmado de infección con el virus de la nueva influenza A (H1N1) se define como una persona que padece una enfermedad similar a la influenza, a partir de la infección con el virus de la nueva influenza A (H1N1), confirmada a través de una o más de las siguiente pruebas de laboratorio:

1. RT-PCR en tiempo real
2. Cultivo viral
   

Duración de la propagación del virus

La duración de la propagación del virus de la nueva influenza A (H1N1) es desconocida. Por lo tanto, hasta que haya información disponible, la duración aproximada de la propagación del virus se basa en la infección por el virus de la influenza de temporada. Se presume que las personas infectadas diseminan el virus y representan un potencial peligro infeccioso a partir del día anterior al inicio de la enfermedad y hasta la desaparición de la fiebre. Las personas infectadas deben ser consideradas contagiosas por un período de hasta 7 días desde el inicio de la enfermedad. Algunas personas infectadas podrían potencialmente propagar el virus y ser contagiosas por períodos más largos (por ejemplo, niños pequeños, personas inmunosuprimidas y personas inmunocomprometidas).

Pruebas del virus de la nueva influenza A (H1N1)

Las médicos clínicos deberían considerar someter a pruebas a los casos con presunto contagio de la nueva influenza A (H1N1), especialmente aquellas personas con enfermedades graves, obteniendo una muestra de las vías respiratorias superiores para detectar el virus de la nueva influenza A (H1N1).

Muestras respiratorias preferenciales

Se deben recolectar las siguientes muestras inmediatamente después del inicio de la enfermedad: hisopado nasofaríngeo, aspirado nasal o hisopado nasal y orofaríngeo combinado. Si no se pueden recolectar estas muestras, un hisopado orofaríngeo o nasal es aceptable. En el caso de los pacientes intubados, también se debe recolectar una muestra mediante aspirado endotraqueal. Las muestras de lavado bronquioalveolar (BAL, por sus siglas en inglés) y cultivo de esputo también son aceptables. Las muestras deben colocarse en un medio de transporte estéril para virus (VTM, por sus siglas en inglés) y deben colocarse en hielo o compresas frías o a una temperatura de 4°C (refrigerador) para su transporte hasta el laboratorio. Las pautas de control de infecciones recomendadas están disponibles para personas encargadas de recolectar muestras en clínicas y otros centros clínicos y para el personal de laboratorio.

Hisopos

Lo ideal sería que los hisopados sean recolectados utilizando hisopos con punta sintética (por ejemplo, poliéster o Dacron®) y un mango de aluminio o plástico. No se recomienda utilizar hisopos con punta de algodón y mangos de madera. No se aceptan las muestras recolectadas con hisopos fabricados con alginato de calcio. Los viales para colocar las muestras con hisopos deben contener 1-3 ml del medio de transporte para virus (por ejemplo, que contenga proteína estabilizadora, antibióticos para controlar el crecimiento bacteriano y micótico y una solución buffer).

Almacenamiento de muestras clínicas

Todas las muestras respiratorias deben conservarse a 4°C y hasta un máximo de 4 días.

Envío de muestras clínicas

Las muestras clínicas deben ser enviadas en hielo común o compresas frías en empaques adecuados. Todas las muestras deben estar claramente etiquetadas y deben incluir la información que solicita el laboratorio de salud pública del estado. Las muestras de posibles casos enviadas desde el laboratorio de salud pública del estado a los CDC deben incluir toda la información requerida para la presentación de muestras o extractos de vigilancia de la influenza de temporada.

Pruebas recomendadas

RT-PCR en tiempo real es la prueba recomendada para confirmar la presencia de casos de la nueva influenza A (H1N)1. Actualmente, las pruebas del nuevo virus de la influenza A (H1N1) arrojan positivo para la influenza A y negativo para H1 y H3 por RT-PCR en tiempo real. Si la reacción de RT-PCR en tiempo real para la influenza A es fuerte (por ejemplo,Ct ylt;30) indica en mayor grado el virus de la influenza A (H1N1). En un principio, la confirmación del nuevo virus de la influenza A (H1N1) mediante RT-PCR en tiempo real sólo podía ser hecha en los CDC, pero en este momento puede estar disponible en laboratorios de salud pública de su estado.

Otros exámenes de influenza

Examen de diagnóstico rápido para el antígeno de la influenza

Algunos exámenes de diagnóstico rápido disponibles en el mercado pueden hacer la distinción entre los virus de la influenza A y B. Un paciente con un examen de diagnóstico rápido positivo para la influenza A puede cumplir con los requisitos de un posible caso de contagio de la influenza A (H1N1). Sin embargo, no es posible establecer la diferencia con respecto a los virus de la influenza A de temporada. Además, estos exámenes presentan una sensibilidad y especificidad desconocidas en la detección del contagio en humanos del nuevo virus de la influenza A (H1N1) en muestras clínicas, y presentan una sensibilidad subóptima en la detección de virus de influenza de temporada. Por consiguiente, un examen de diagnóstico rápido negativo podría ser un falso negativo, y no debe interpretarse como examen de diagnóstico definitivo de contagio de la nueva influenza A (H1N1).

Inmunofluorescencia (DFA o IFA)

Estas pruebas pueden diferenciar entre el virus de la influenza A y B. Un paciente con un resultado positivo para la influenza A por inmunofluorescencia puede cumplir los requisitos para un posible caso. Sin embargo, no es posible establecer la diferencia con respecto a los virus de la influenza A de temporada. La inmunofluorescencia depende de la calidad de la muestra clínica, las habilidades del operador, y presenta sensibilidad y especificidad desconocidas en la detección del contagio en humanos de la nueva influenza A (H1N1) en las muestras clínicas. Por lo tanto, un resultado negativo de una prueba de diagnóstico por inmunofluorescencia podría ser un falso negativo, y no debe interpretarse como examen de diagnóstico definitivo del contagio de la nueva influenza A (H1N1).

Cultivo viral

El aislamiento del nuevo virus de la influenza A (H1N1) es un método de diagnóstico de la infección, pero no puede producir resultados oportunos para el manejo clínico. Un cultivo viral negativo no excluye la posibilidad de infección por el nuevo virus de la influenza A (H1N1).